Sisältö
Mikrobiviljelmillä tehdyt tutkimukset edellyttävät usein niissä olevien organismien tunnistamista. Kun pieni osa viljelmästä lisätään ravintoalustaa sisältävään agariin, on mahdollista erottaa bakteerimassa yksittäisiksi pesäkkeitä muodostaviksi yksiköiksi. Jokainen näistä yksiköistä kehittyy erillisissä pesäkkeissä, joilla on ominaisuuksia, jotka auttavat tunnistamaan organismin.
Tarkoitus
Mikrobiologiset tutkimukset edellyttävät tiettyjen organismien morfologian tutkimista. Joissakin tapauksissa sekaviljelmässä läsnä olevat organismit on erotettava toisistaan ennen kuin ne voidaan analysoida. Siksi on tärkeää eristää nämä mikrobipesäkkeet. Bakteeriviljelmät sisältävät suuren määrän soluja yhdessä tipassa. Kylvö uuttamalla agarlevylle laimentaa ne siten, että yksi bakteerisolu kerrostuu levyn tietylle alueelle. Useat näistä yksittäisistä soluista erotetaan muutaman millimetrin välein. Kukin niistä jakautuu muodostaen tuhansia uusia soluja aiheuttaen eristettyjä pesäkkeitä.
Periaate
Agar-levy tarjoaa ravinteita sisältävän väliaineen, joka stimuloi mikro-organismien kasvua ja lisääntymistä. Jäteveden kylvöissä käytetään kvadranttisuuntausmenetelmää, jossa koko levy on jaettu neljään kvadranttiin. Kun siirryt kvadrantista toiseen, alkuperäinen kulttuuri laimennetaan asteittain koko käytettävissä olevan pinnan yli. Neljännes, josta aloitat, osoittaa tiheää ja erottamatonta mikrobikasvua, joka näyttää mikro-organismien matolta, kun taas viimeinen näyttää eristettyjä pesäkkeitä.
Materiaalit
Pakokaasukylvöinti vaatii ravinteiden agar-levyt, silmukan ymppäämiseksi, bakteeriviljelmän, desinfiointiliuoksen, kuten 10-prosenttisen Lysolin, ja Bunsen-polttimen. Tarvitset myös turvavarusteita, kuten esiliina, käsineet ja roiskesuojalasit. Inokulaatti venytysmerkkien muodostamiseksi valmistetaan bakteeriviljelmästä silmukan avulla ja naarmuuntamalla ravinteiden agar-levyjä. Bunsen-poltin on tarkoitettu kahvan liekittämiseen urien aikana. Puhdista pinta desinfiointiaineella ennen kokeen aloittamista.
Menetelmä
Käytä pientä määrää ympykettä kylvääksesi ensimmäiseen neljännekseen edestakaisin. Liekki kahvasta ja anna sen jäähtyä koskettamalla sitä agar-levyn osaan, jota ei ole ympätty. Kosketa sitä juuri kylvämäsi alueen toiseen päähän ja venytä se sieltä toiseen kvadranttiin. Palaa ja jäähdytä silmukka uudelleen ja toista alue toisesta neljänneksestä. Toista sama prosessi neljännellä kvadrantilla.
