Sisältö
Valomikroskoopin edut ja haitat koskevat valoa, suurennusta ja tarkkuutta. Valomikroskoopit suurentavat näkyvää valoa - ilmeinen etu, koska silmämme näkevät tämän. Suurennus (kuinka suuri esine näyttää) ja resoluutio (yksityiskohtien selkeys) ovat kuitenkin rajallisia valomikroskooppeja käytettäessä.
Valonlähde
Valomikroskoopit käyttävät joko heijastavaa peiliä tai sähkövaloa suoraan valaistukseen näytteen läpi ja linssijärjestelmään. Peilijärjestelmät ovat halvempia, mutta vaativat riittävän ympäristön valaistuksen ja enemmän kärsivällisyyttä säätämiseen. Sähkövalojärjestelmät ovat kalliimpia ja vaativat pistorasian lähellä, mutta ovat yksinkertaisempia käyttää.
Valon voimakkuus
Valon voimakkuus (kirkkaus) on tärkeä, kun valo kulkee tarkasteltavan näytteen läpi. Ohut, läpikuultava näyte (kirkas) nähdään parhaiten pienitehoisella valolla, kun taas paksummat ja läpinäkymättömät näytteet vaativat suurempaa intensiteettivaloa. Valomikroskopian haittana on, että jotkut näytteet ovat liian paksuja tai läpinäkymättömiä, jotta niitä voidaan nähdä tämän tyyppisissä mikroskoopeissa. Hyvin ohuet tai läpikuultavat näytteet voidaan värjätä kontrastin lisäämiseksi paremman visualisoinnin takaamiseksi. Tämä prosessi kuitenkin tappaa elävät yksilöt.
Valon voimakkuuden säätäminen
Kalvo, joka sijaitsee valonlähteen yläpuolella ja vaiheen (näytealustan) alapuolella, säätää näytteen läpi kulkevan valon määrää. Saatavana on kahden tyyppisiä kalvoja: kiinteä aukonvalitsin ja säädettävä kameratyyppinen aukko.
Kiinteä aukko koostuu useista erikokoisista aukoista pyörivällä levyllä. Haluttu aukko valitaan kääntämällä valitsinta. Kiinteän aukon kalvot ovat halvempia, mutta tarjoavat vähemmän tarkkaa valon voimakkuutta.
Säädettävä aukon kalvo tarjoaa jatkuvasti vaihtelevan aukon koon, aivan kuten kameran linssin f-stop, ja säätää siten tarkemmin valon voimakkuutta. Nämä järjestelmät ovat kalliimpia.
Laajentuminen
Suurempi ei ole aina parempi. Valomikroskoopit voivat suurentaa esineitä jopa 1000x (tuhat kertaa elämää suurempia) erittäin hyvin. Lisäksi kuva muuttuu yhä vääristyneemmäksi ja epäselvemmäksi. Koon suurentaminen ei paranna kuvaa, ja itse asiassa tekee siitä kuvan käyttökelvoton.
Jopa 1000x suurennuksella voidaan nähdä kaikenlaisia eläviä organismeja, jopa pienimmät bakteerisolut. Tämä tekee valomikroskopiasta tehokkaan työkalun solutyyppien, lammen veden, maaperänäytteiden ja muiden tutkimusten tutkimiseen, joissa halutaan yleiskatsaus mikro-organismeista. Valomikroskopialla ei kuitenkaan ole juurikaan hyötyä osa-alueiden rakenteiden tutkimiseen, koska valon käytölle on ominaista resoluutio.
Resoluutio
Tarkkuus on mitta kuvassa tuotettujen hyvien yksityiskohtien selkeydestä. Matalan resoluution kuvat näyttävät epäselviltä tai "sumeilta". Korkean resoluution kuvat ovat teräviä, selkeitä ja yksityiskohtaisia. Valomikroskooppien suurin haitta on resoluutioraja. 1000-kertaisen suurennuksen lisäksi valomikroskoopit menettävät nopeasti kyvyn hienosäätää pieniä yksityiskohtia. Tämä johtuu valon fysikaalisista ominaisuuksista, ei instrumentin laadusta. Alakennorakenteiden yksityiskohtien parempaan erottamiseen tulisi käyttää muita tekniikoita, kuten elektronimikroskooppeja.
