Sisältö
Mikrobiologit tutkivat mikro-organismien, kuten levien, bakteerien, alkueläinten, sienien ja virusten, ominaisuuksia mikroskoopilla. Vaikka jotkut organismit, kuten alkueläimet ja hiivasolut, on helppo nähdä dioiden läpi, bakteerisolut vaativat värjäystä. Tutkijat ovat kehittäneet useita menetelmiä, kuten Gram-värjäystekniikan, haponkestävän värjäyksen ja fluoresoivan värjäyksen bakteerisolujen ja solurakenteiden visualisoinnin parantamiseksi. Tällaisilla värjäysmenetelmillä on mahdollista tunnistaa rakenteelliset ominaisuudet, jotka auttavat bakteerien luokittelussa.
Parempi katselu
Bakteeri-organismit ovat niin pieniä, että suurin osa niistä on näkyvissä vain mikroskoopin alla 1000-kertaisella suurennusteholla. Yksinkertainen koon kasvu ei kuitenkaan anna riittävää selkeyttä, joten bakteerit on siksi väritettävä ennen havainnointia visualisoinnin edellyttämän selkeyden aikaansaamiseksi.
Tunnistaminen ja luokitus
Bakteerien värjäys bakteerityyppien erottamiseksi tunnetaan differentiaalivärjäyksenä. Gram-tahra on erilainen tahra, joka erottaa bakteerit soluseinän sisällöstä riippuen. Tässä menetelmässä bakteerisolut reagoivat violetin kristallivärin kanssa violetiksi. Valkaisuaineen lisäämisen myötä jotkut bakteerisolut menettävät värinsä, kun taas toiset eivät. Safraniiniväriaineen lisäämisen myötä värjäytyneet solut muuttuvat punaisiksi, kun taas bakteerisolut, jotka eivät menetä väriä, pysyvät violetteina. Soluja, jotka muuttuvat punaisiksi, kutsutaan gram-negatiivisiksi organismeiksi, ja solut, jotka eivät muutu punaisiksi, luokitellaan gram-positiivisiksi organismeiksi. Gram-värjäystekniikka tarjoaa nopean menetelmän infektioihin osallistuvien bakteerien tunnistamiseksi. Samoin haponkestävä värjäysprosessi auttaa tunnistamaan mykobakteereiksi kutsuttujen bakteerien luokkaan kuuluvat organismit, kuten Mycobacterium tuberculosis.
Toteutettavuuden havaitseminen
Bakteeriviljelminäytteissä on usein tärkeää havaita elävien bakteerisolujen läsnäolo. Menetelmät, kuten fluoresoiva värjäys, auttavat tunnistamaan viljelysolujen elinkelpoisuuden vai ei. Elävillä bakteereilla on kyky muuntaa tetratsolium-5-syaani-2,3-ditolyylikloridi (CTC) väriksi, jolla on punainen fluoresenssi. Siksi, kun CTC-väriset viljelmät lähettävät näitä fluoresensseja, se osoittaa elinkelpoisten bakteerien läsnäolon. Propidiumjodidi on tahra, joka vaikuttaa vain elottomiin soluihin, joilla on vaurioituneita kalvoja, ja on siksi hyödyllinen kuolleiden bakteerisolujen tunnistamisessa.
Solurakenteiden tunnistaminen
Värjäys tarjoaa menetelmän erilaisten solurakenteiden selkeäksi visualisoimiseksi. Esimerkiksi Feulgen-värjäysmenetelmä mahdollistaa ytimen tunnistamisen bakteerisoluissa, kun taas Albert-värjäys on hyödyllinen metakromaattisten rakeiden visualisoinnissa. Samoin hopean kyllästystekniikka mahdollistaa spirokeetien tunnistamisen. Flagelloja on helppo havaita, kun ne on värjätty Ryun värillä. Malakiittivihreä värjäys auttaa tunnistamaan bakteerien itiöt.
